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取材

从患者到病理学家,准备样本进行诊断需要细心、经验以及合理的流程。本指南提供了很多有建设性的建议,更简单的方法去避免常规错误。

本周指南中提供了做好样本收集和转运的小贴士,我们想提供更多有建设性的建议,更简单的方法去避免常见错误。

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步骤12 - 检查固定的状态

 先进行样品固定状态的检查,特别是大样本;

 样品没有检查固定的状态就直接进行脱水。

容器中的样本需及时检查固定状态,以确保合适的固定。
检查固定的状态

步骤13 - 制备薄片

 大标本需切成薄片(厚约3-4 mm)且厚度要均一,质地致密的组织尤其重要;

 切片厚度≥6mm,厚度不均一。

图示为肿块脱水切片薄(2-3mm)且均一。此切片能进行有效的脱水并且易于切成蜡片。
制备薄片

步骤14 - 避免样本损伤

 仔细处理样本,特别是没有充分固定的组织样本(轻拿、不挤压、使用锋利的刀片);

 样品没有考虑到固定的状态就随便拿取,有时候还使用钝的刀进行取材。

H&E染色的肺:使用钳子随意夹取组织,引起组织局部有明显的损伤。新鲜的或者固定不充分的组织很容易受损,即使是一些固定充分的组织也会因随意夹取而受损。
避免样本损伤

步骤15 - 避免交叉污染

 每一个样本都放在干净的器皿里,避免样本和样本间的交叉污染;

 不同组织样本在取材的时候,取材板不干净,这会导致不同样本间的交叉污染。尤其是前后进行同一类型标本取材时尤其重要,如果发生携带污染可能会将恶性组织混入良性组织中。

H&E染色肺:含有肝的碎屑,在取材过程中被污染的。
避免交叉污染

步骤16 - 小心使用活检垫

 新鲜或者固定不充分的样本没有包在泡沫活检垫中,特别是空心针活检(避免活检垫的人工损伤);

 有时候小的、新鲜的或者固定不充分的样本被放在活检垫中,然后装入包埋盒进行固定,这会引起典型的人工“假象”。

新鲜的或者固定不充分的组织在脱水过程中使用泡沫活检垫,活检垫会对组织产生局部压力,导致细胞结构变化,形成可见的三角空间结构。
小心使用活检垫

步骤17 - 选择合适的包埋盒

 不同类型的组织样本使用合适的包埋盒进行脱水。组织碎片在脱水过程中容易皱缩,如果包埋盒过大的话,碎片会漏到脱水试剂中,甚至转移到其他样本中;

 “一种大小满足所有”:一个包埋盒放置所有大小的样本。

A. 一些小的组织碎片从包埋盒中漏出,脱水过程(组织会发生皱缩)该现象特别容易发生;
B. 合适大小的包埋盒放置合适大小的组织。
选择合适的包埋盒

步骤18 - 避免包埋盒超载

 从不让包埋盒超载,如果组织太大的话,使用第二个包埋盒;

 组织充满包埋盒,这会阻碍脱水试剂的流通,导致脱水效果差。有时可能导致样本变形。

图中包埋盒都超载了,如果继续进行脱水的话,有可能导致样本变形或者脱水不充分。
避免包埋盒超载

步骤19 - 准确、清楚地标记包埋盒

 为了更准确地识别样本,包埋盒必须进行清楚的标记;

 有时候很难去辨识包埋盒上的标记,只能猜测其内容。

以上这些模糊不清的标记均不能使用。
准确、清楚地标记包埋盒

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