Enregistrement de patch-clamp de terminaisons de fibres moussues sur des tranches d'hippocampe

¹Institut de Physiologie, Université de Fribourg, Hermann-Herder-Strasse 7, D-79104 Fribourg, Allemagne. ²Groupe Indépendant Hertie Research, Institut Max-Planck pour la Recherche sur le Cerveau, Deutschordenstrasse 46, D-60528 Francfort, Allemagne. Toute correspondance doit être adressée à P.J. (peter.jonas@physiologie.uni-freiburg.de)

L'analyse rigoureuse de la transmission synaptique dans le système nerveux central nécessite l'accès aux terminaisons présynaptiques Les terminaisons corticales, de par leur petite taille, ont jusqu'à ce jour été largement inaccessibles à l'enregistrement présynaptique en patch-clamp.

Des techniques améliorées de patch-clamp effectuées sur des tranches de cerveau nous ont permis d'obtenir des enregistrements de terminaisons de fibres moussues d'un diamètre de 2–5 µm dans la région CA3 de l'hippocampe.

Les principales améliorations sont la visibilité accrue fournie par les objectifs à grande ouverture numérique et l'illumination en infrarouge, le développement de vibratomes à vibration verticale minimale et l'utilisation de solutions de saccharose pour le stockage et la coupe.

Sur base de ces améliorations, nous décrivons un protocole qui nous permet l'enregistrement de routine de boutons de fibres moussues dans l'hippocampe. Des enregistrement présynaptiques peuvent être obtenus dans des tranches de rats et de souris.

Ils peuvent aussi être obtenus dans des tranches de souris transgéniques chez lesquelles les terminaisons sont marquées avec une protéine fluorescente verte améliorée.

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